下面是小编为大家整理的输血科凝聚胺介质配血、不完全抗体筛查试验SOP,供大家参考。
浙江省 XX 市 XX 县人民医院输血科
凝聚胺介质配血、抗体筛查试验 SOP 页数/总页数
1/3 版序 C 版 文件编号 SXK-SOP-3.5 ［测定方法］凝聚胺介质法 ［原理］红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷吸引，此时红细胞被扩散的双层离子云围绕形成 Zeta 电位，Zeta 电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺（Polybrene）试验是利用一种低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（浆）中的抗体结合。其后加人凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞 Zeta 电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异的凝聚。最后加入悬浮液（Resuspending），Resuspending 具有中和凝聚胺（Polybrene）的作用，使正常的红细 胞非特异性凝集散开，结果为阴性；但红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，结果为阳性。
［试剂］交叉配血试验试剂来源：珠海贝索生物技术有限公司。贮存：2-25 摄氏度贮存。
1、LIM（LOW Lonic Medium）：低离子介质溶液
2、Polybrene Solution: 凝聚胺溶液
3、Resuspending Solution:悬浮液
4、阳性对照 抗体筛选试剂来源：上海血液生物医药责任有阴公司。贮存：2-25 摄氏度贮存。
I、II、III 型抗体筛选红细胞。
［质量控制］每天取 RHDIgG 抗血清稀释后作为阳性对照血清与 RHD 阳性红细胞做交叉试验，详细步骤同交叉配血试验 1-5，结果凝集为合格。质控在控试剂方可用于交叉配血检测，如失控要查找原因采取处理措施，并在日常工作记录表中记录质控情况。试剂新开瓶或出现可疑情况时需加做质控。每次交叉配血时需同步进行质控操作。
［操作步骤］
一、交叉配血试验：
1、取试管参支，标主次测和混合管。主测管加病人血清（浆）2 滴，加供血者 3～5%红细胞悬液 1 滴。次侧管加供血者血清（浆）2 滴，加病人 3～5%血球 1 滴。混合管加病人血清（浆）2 滴 3～5%血球 1 滴、供血者血清（浆）2 滴 3～5%红细胞悬液 1 滴。
浙江省 XX 市 XX 县人民医院输血科
凝聚胺介 质配血、抗体筛查试验 SOP 页数/总页数
2/3 版序 C 版 文件编号 SXK-SOP-3.5 2、各加 LIM 0.7ml，混合均匀后，再各加 Polybrene 溶液 2 滴，并混合均匀，
室温孵育 15 秒。两液必须按顺序加入。
3、3400rPm（相当于 1000g 离心力），离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约 0.1ml 液体。
4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
5、最后加 2 滴 ResusPending 2 滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在30 秒至 1 分钟内凝集散开，代表是由 Polybrene（凝聚胺）引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察有无凝集。
二、抗体筛检试验 1、取试管三支，各加病人血清（浆）2 滴，分别加入 3～5%筛检红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各 1 滴。
2、各加 LIM 0.7ml，混合均匀后，再各加 Polybrene 溶液 2 滴，并混合均匀。
3、3400rPm，离心 10 秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约 0.1m液体。
4、轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做。
5、最后加入 ResusPending 2 滴，轻轻转动试管混合并观察结果。如凝集散开，表示由 Polybrene（凝聚胺）引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性。如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
三、结果判断 交叉配血试验 抗体筛检试验 判
断 － － 病人血清中没有异体抗体，供血者血液适用。
－ ＋ 病人血清中有异体抗体，但此供血者血液适用，建议继续作抗体鉴定试验。
＋ ＋ 病人血清中有异体抗体，此供血者血液不适用，换其他供血者的血液做配血试验。
＋ － 病人血清中有异体抗体，此供血者血液不适用。但其所作用的抗原为稀有抗原，可能仅存在于此供血者的血球上，三种筛检红细胞上无此抗原。换其他供血者的血液做配血试验。
浙江省 XX 市 XX 县人民医院输血科
凝聚胺介质配血、抗体筛查试验 SOP 页数/总页数
3/3 版序 C 版 文件编号 SXK-SOP-3.5
［临床意义］用于完全抗体及不完全抗体的筛选检测、交叉配血、红细胞抗原检测等。
［注意事项］ 1、可以用含 EDTA 抗凝血浆代替血清使用。2、若病人血清（血浆）含有肝素(Heparin)，如洗肾患者，须多加 4-6 滴 Polybrene （凝聚胺溶液）以中和肝素。3、试剂使用前需回复室温再行操作。4、冬季室温较低，应将试管保温或提高室温。以防冷凝集干扰。若怀疑病人有寒冷凝集素等因素，而导致假凝集，可在最后滴入 ResusPending 时，将试管立即置入 37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在 30 秒内观察结果。
[参考资料]试剂说明书、《临床检验管理与技术规程》浙江大学出版社第一版
起草人 审核人 审核日期 起用日期
20110401 20110401
推荐访问:输血科凝聚胺介质配血、不完全抗体筛查试验SOP 输血 抗体 不完全